期刊简介
本刊系中国药学会福建分会主办，福建省食品药品监督管理局主管。为中国学术期刊综合评价数据库统计来源期刊。主要报道药剂学、药理学、药物化学、药物分析、中药与天然药物等方面的研究论文。读者对象主要是从事药品生产、教学、科研、检验和临床药学工作者。
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首页>海峡药学杂志
- 杂志名称：海峡药学杂志
- 主管单位：福建省食品药品监督管理局
- 主办单位：中国药学会福建分会
- 国际刊号：1006-3765
- 国内刊号：35-1173/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：《CAJ-CD规范》执行优秀期刊期刊收录：国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中)
人重组FLT3配体在昆虫细胞中的表达、纯化和鉴定
陈萍
关键词：人FLT3配体, 杆状病毒, 昆虫细胞
摘要：目的 人FLT3配体(hFLT3L)是一种能有效地刺激早期造血的细胞因子,本研究利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在昆虫细胞中分泌表达hFLT3L具有活性的胞外区.方法 从前期构建的pGH-rhFLT3L中扩增目的基因,构建到pEASY-blunt,再将目的基因连接到pFastBacTM1,pFastBacTM1-rhFLT3L转化DH10Bac发生位点特异性转座,通过抗生素和蓝白斑筛选阳性克隆.PCR鉴定Bacmid-rhFLT3L重组质粒并转染Sf9昆虫细胞,利用病毒感染High Five细胞进行蛋白表达,采用Ni+亲和层析和凝胶过滤层析分离纯化.结果 纯化样品质谱鉴定为hFLT3L胞外区,分子量为18.0~19.2kDa,生物学活性测定估算rhFLT3L表达量约56mg·L-1,纯化样品活性为3.1×106RU·mg-1,与R&D标准品相当,为其科研和临床应用奠定了坚实的基础.
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