期刊简介

               本刊系中国药学会福建分会主办,福建省食品药品监督管理局主管。为中国学术期刊综合评价数据库统计来源期刊。主要报道药剂学、药理学、药物化学、药物分析、中药与天然药物等方面的研究论文。读者对象主要是从事药品生产、教学、科研、检验和临床药学工作者。                

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  • 杂志名称:海峡药学杂志
  • 主管单位:福建省食品药品监督管理局
  • 主办单位:中国药学会福建分会
  • 国际刊号:1006-3765
  • 国内刊号:35-1173/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:《CAJ-CD规范》执行优秀期刊期刊收录:国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中)
海峡药学杂志2010年第04期

打靶载体PIJ792的构建

张南燕;洪文荣;林玉双;樊伟明

关键词:基因打靶, 金色链霉菌, 氯霉素抗性基因
摘要:目的 利用pIJ790,pIJ773和pUC19等基本质粒,构建金色链霉茵基因打靶筛选体系所需质粒pIJ792.方法 以质粒pIJ790为模板,将PCR扩增的cat基因片段插入到pMD19-T的多克隆位点,得重组质粒pFD31.EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切pIJ773,其小片段与pUC19经同样双酶切后的片段酶连克隆,得新质粒pFD32.pFD31和pFD32再分剐经Sac Ⅰ酶切,将pFD31含Cat的小片段和pFD32的大片段酶连克隆,筛选得重组质粒pFD33,EcoR Ⅰ与Hind Ⅲ酶切,将切下的两个小片段与pIJ773经同样双酶切后的大片段进行酶连克隆,终得筛选质粒pIJ792.结果 新质拉pIJ792的抗氯霉素能力超过150λg·mL-1.结论 pIJ792可满足金色链霉菌基因打靶的筛选需要,实现了用于金色链霉菌PCR基因打靶所需筛选体系的构建.